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记录神经干复合动作电位医学信号采集处理系统怎么做?

2024-01-20 20:24:59

   神经干动作电位是神经兴奋的客观标志,给具有兴奋性的神经干以一定强度的刺激,会发生动作电位。处于兴奋部位的膜外电位负于静息部位。当神经冲动通过后,兴奋处的膜外电位又恢复到静息时水平。神经干兴奋过程所发生的这种膜电位变化称神经干动作电位。

  如果两引导电极置于正常完整的神经干表面,当经理干一端兴奋后,兴奋波先后通过两个引导电极处,可记录到两个方向相反的电位偏转波形,称为双相动作电位。如果两个引导电极之间的神经组织有操作,兴奋波只通过第一个引导电极,不能传导至第二个引导电极,则只能记录到一个方向的电位偏转波形,称为单相动作电位。

  神经干由很多神经纤维组成,故神经干动作电位与单根神经纤维的动作电位不同,它是由许多神经纤维动作电位综合成的综合性电位变化。此外,这是在细胞外记录,与细胞内记录不同。所以,神经干动作电位幅度在一定范围内可随刺激强度的变化而变化。

  动作电位在神经纤维上的传导有一定的速度。不同类型的神经传导速度(υ)各不相同,神经纤维越粗,则传导速度越快。蛙类坐骨神经干中以类纤维为主,传导速度大约35~40m/s。测定神经冲动在神经干上传导的距离(s)与通过这些距离所需的时间(t),即可求出神经冲动的传导速度。

  我们将ZL-620U医学信号采集处理系统引入本次实验,来学习记录神经干复合动作电位的方法,掌握动作电位的测量,了解神经兴奋传导速度及其测定方法,加深理解性和兴奋传导的概念。

 【实验对象】 

    蟾蜍或蛙。

【实验器材】

ZL-620U医学信号采集处理系统、蛙类手术器械、标本屏蔽盒、带电极的接线若干、林格液。

【方法和步骤】

1. 制备蟾蜍坐骨神经干标本

(1) 方法一:标本制备方法与坐骨神经腓肠肌标本制备方法大体相同。

应注意:

1) 神经干应尽可能分离得长一些。要求上自脊椎附近的主干,下沿腓总神经与胫神经一直分离至踝关节附近为止。

2) 神经干分离过程中切勿损伤神经组织,以免影响实验效果。

3) 神经两端要用细线扎住,然后浸于林格液中备用。

(2) 方法二:取剥皮后的蟾蜍下部躯干,取俯卧位,用尖头镊夹住骶骨尾端稍向上提,用组织剪水平剪除骶骨。然后将标本仰卧,用玻璃分针分离脊柱两侧坐骨神经干,穿线,紧靠脊柱分别结扎神经,并剪断神经,提起线头,从骶骨剪口处穿向背侧,将标本俯卧,用大头针将标本固定。用手轻提一侧结扎神经的线头,辨清坐骨神经走向,然后置剪刀于神经与组织间,紧贴股骨、腘窝,顺神经走向把神经连同肌肉一起剪下,直至跟腱,剪断跟腱和神经。提起剪下的神经肌肉标本,用镊子夹住腓肠肌表面,顺神经干向轻拉,去除肌肉组织后,一根坐骨神经干标本便制备好了。

2. 连接实验装置

(1) 按图1所示用导线连接实验仪器。ZL-620U的刺激输出连接一对刺激电极,两对引导电极连接ZL-620U的CH2和CH4两个通道,地线接地。必须避免连接错误或接触不良。

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                                    图1  观察神经干动作电位及测定神经冲动传导速度装置图

(2) 标本屏蔽盒内衬以浸湿林格液的滤纸,以增加盒内空气湿度,防止神经干迅速干燥。

(3) 将神经干标本旋转在刺激电极、接地电极和引导电极上。

(4) 启动ZL-620U医学信号采集处理系统,设置参数(表1)。刺激模式也可采用单刺激或主周期刺激,逐步改变刺激幅度。  

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3. 实验观察

1) 观察不同刺激强度对神经干动作电位的影响:逐渐增大刺激强度,找出刚能引起微小的神经干动作电位的刺激强度(阈强度)。继续增强刺激强度,神经干动作电位也相应增大。当动作电位增至最大时(不再随刺激强度而增大),该刺激强度即为最大刺激强度。

(2) 仔细观察双相动作电位波形。读出最大刺激时双相动作电位上下相的幅度和整个动作电位持续时间。

(3) 观察把神经干标本旋转方向倒换后双相动作电位波形有何变化。

(4) 测定动作电位传导速度

1) 给予神经干最大刺激强度的刺激,在通道2、4的采样窗中,可观察到先后形成的两个双相动作电位波形。

2) 分别测量从刺激伪迹到两个动作电位起始点的时间,设通道2为t1,通道4为t2(或可直接测量两个动作电位起点的间隔时间),求时间差值。

3) 测量标本屏障盒中CH2与CH4两对引导电极之间的距离s(应测r1~r2的间距)。

(5)观察和测定单相动作电位波形(在损伤神经标本之前,可先做“神经干动作电位不应期的测定”的实验)。

 1) 用镊子将CH4两个记录电极之间的神经夹伤或用药物阻断,再刺激时呈现单相动作电位。

2) 读出最大刺激时单相动作电位的振幅值和整个动作电位持续时间数值。

3) 比较单相动作电位的上升时间和下降时间的长短,并分析与双相动作电位波形的关系。

【实验结果】

1. 找出波宽为某一数值时的阈上刺激范围,并记下阈刺激、最大刺激的数值。

2. 打印双相与单相动作电位波形,测出其最大幅值及持续时间。

3. 计算神经冲动的传导速度:υ=s/(t2-t1)(m/s)。